第五节　实验室检查

皮肤组织病理和普通病理一样，其常规检查手段仍为将皮肤活检标本用10%中性福尔马林固定（寒冷季节，为避免标本冻结，可在固定液中加95%的乙醇）。固定时间应充足，一般4mm的标本需要8小时，大的标本如切除的肿瘤则应先切成4～5mm厚的薄片再固定、石蜡包埋、切片、苏木素-伊红（HE）染色。此种组织检查技术迄今仍在应用，其优点为实用、价廉、方法简单、易于操作。应用这种染色方法可将细胞核染成蓝色，而胞浆、胶原纤维、肌肉等染成红色，能解决大部分诊断问题，但有时为了特殊目的，如显示特殊病菌（图3-45）或特异性组织结构（图3-46，图3-47），常需借助特殊染色方法，酶组织化学，免疫组化等供诊断分析。分述如下：

一、特殊染色（表3-1）

二、酶组织化学

由于酶组织化学涉及的技术复杂，要求新鲜组织进行检查，以及大多数反应相对为非特异性，目前此种技术应用很有限。在皮肤组织病理上，最常应用的方法是氯乙酸酯酶也称Leder染色，用来鉴定肥大细胞或骨髓来源的造血细胞和dopa反应用以鉴定黑色素细胞。

三、免疫组化

（一）非肿瘤性疾病

1.大疱性疾病

免疫荧光检查在评估原发性大疱性疾病中有些呈现出相当特异的反应类型（表3-2）。

2.结缔组织病

免疫荧光检查对结缔组织病特别是红斑狼疮诊断有帮助。免疫球蛋白（IgG，IgM，IgA，IgE）和补体（C₁，C₃，C₄，C₅）常见于盘状红斑狼疮（DLE）的皮损，沿基底膜呈颗粒状沉积。系统性红斑狼疮（SLE），免疫球蛋白和补体的沉积不仅见于皮损处，亦见于临床上正常外观的皮肤。正常外观皮肤呈现免疫球蛋白和补体沉积的现象，在诊断上称“狼疮带试验（Lupus band test）”。此试验有助于区别SLE和DLE。DLE狼疮带试验应为阴性，约60%的SLE患者呈阳性反应。SLE患者的非曝光部皮肤，狼疮带试验有提示预后的价值，如阳性时则提示预后差。此外，SLE患者中免疫球蛋白和补体，不仅沿基底膜带沉积，也可围绕血管沉积和弥漫性沉积于胶原纤维束间。

阳性免疫球蛋白沉积，也常见于许多其他结缔组织病如硬皮病或皮肌炎。但大多数病例中，其免疫荧光类型无特异性。

3.血管炎

免疫球蛋白阳性见于许多皮肤血管炎。常很难判断受损血管免疫球蛋白和补体的沉积是原发还是继发的。在诊断上最有用的是对过敏性紫癜的诊断，免疫荧光检查证明IgA沉积对确定诊断是十分重要的。

4.传染病的免疫病理

制备检测传染物的直接抗体多应用于福尔马林固定，石蜡包埋的组织，通常依靠酶结合抗体（过氧化酶或磷酸酶）而不是依靠荧光。最常应用的抗体为单纯疱疹病毒Ⅰ型或Ⅱ型抗体。亦可应用对其他病毒或细菌的许多抗体。

（二）肿瘤性疾病

免疫组织化学在确定肿瘤细胞来源上起着非常重要的作用。而皮肤科医师常常针对镜下改变，不知该选择何种标记或者选择的标记有遗漏。表3-3也许对规范选择免疫标记有帮助。

1.皮肤淋巴样细胞浸润

免疫组织化学在淋巴样细胞的确定上起着非常重要的作用。

2.非淋巴样造血细胞浸润

免疫组化检查对评估造血细胞浸润也很重要。造血细胞浸润包括朗格汉斯细胞增生和白血病。朗格汉斯细胞在免疫组化上用S100，CD1a和CD207能最好识别。

大多数皮肤白血病浸润为骨髓性。识别骨髓性白血病的有用标志物包括过氧化物酶、氯乙酸酯酶、Leu-M1（CD15）和KP-1（CD68）。

3.上皮样肿瘤

细胞角蛋白和上皮基底膜抗原（EMA）为鉴别上皮的最重要的标志物。通常用于评估未分化原发性肿瘤或转移癌。有些标志物如甲状腺球蛋白，降钙素或前列腺特异性抗原有助于发现可能的原发灶。

4.黑色素细胞肿瘤

许多标志物有助于鉴别黑色素细胞起源的损害。对评估分化差（一般为无黑色素性）的原发性或怀疑为黑色素瘤的转移十分需要。类似黑色素瘤的原发性肿瘤包括梭形细胞鳞状细胞癌，非典型性纤维黄色瘤，平滑肌肉瘤，恶性周围神经鞘肿瘤和神经内分泌癌。

尽管已研制出大量黑色素细胞标志物，但目前只有两种标志物即S-100蛋白和HMB-45是普遍应用的。S-100蛋白是迄今对黑色素细胞最敏感的标志物，但它并非特异性的。它也可表达于施万细胞，星形细胞，朗格汉斯细胞，软骨细胞和多种其他细胞。HMB-45能对多种痣，特别是蓝痣，Spitz痣和表皮内非典型（发育不良）痣和一些普通痣以及许多黑色素瘤细胞染色。它并不完全是特异性的，此标志物的阳性染色亦见于许多非黑色素细胞损害，包括血管肌脂肪瘤，某些乳腺癌和神经胶质肉瘤。应当注意的是大多数结缔组织增生性黑色素瘤对HMB-45呈阴性表达，但几乎所有结缔组织增生性黑色素瘤均对S-100蛋白呈阳性表达。

（冯义国　刘业强）